EMMPRIN/CD147 Plasmide Double Nickase (h): sc-400589-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- EMMPRIN/CD147 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il EMMPRIN/CD147 Double Nickase Plasmid (h) e il EMMPRIN/CD147 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira BSG. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: EMMPRIN/CD147 Antibody (8D6): sc-21746
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
EMMPRIN/CD147 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400589-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
EMMPRIN/CD147 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400589-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Basigin (BSG), nota anche come EMMPRIN/CD147, è una proteina transmembrana altamente glicosilata della superfamiglia delle immunoglobuline che organizza le interazioni cellula–cellula e cellula–matrice e modula molteplici reti di segnalazione. È conosciuta soprattutto per la capacità di stimolare la produzione di metalloproteinasi della matrice (MMP) e di facilitare il rimodellamento della matrice extracellulare, con effetti a valle su invasione, risposte angiogeniche e segnalazione infiammatoria. CD147 funge anche da chaperone per i trasportatori di monocarbossilati (ad es., MCT1/MCT4), collegando il trasporto del lattato alla riprogrammazione metabolica e alle vie adattative all’ipossia. Un’espressione deregolata di BSG è associata a progressione tumorale, fibrosi e interazioni patogeno–cellula ospite, rendendola un nodo centrale per studi sul rimodellamento del microambiente e sull’accoppiamento metabolico.
EMMPRIN/CD147 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus BSG nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di BSG. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di BSG. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con BSG interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.