Embigin Plasmide Double Nickase (h): sc-408321-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Embigin Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Embigin Double Nickase Plasmid (h) e il Embigin Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira EMB. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Embigin Plasmide Double Nickase (h) | sc-408321-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Embigin Plasmide Double Nickase (h2) | sc-408321-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
L’EMB umano codifica l’embigina, una glicoproteina di membrana di tipo I appartenente alla superfamiglia delle immunoglobuline, che funge da molecola accessoria per i trasportatori di monocarbossilati e contribuisce alle interazioni cellula–cellula e cellula–matrice. Modulando il flusso di lattato e di altri monocarbossilati e partecipando alla segnalazione legata all’adesione, l’embigina può influenzare l’omeostasi metabolica, il traffico di membrana e i programmi di migrazione cellulare. L’espressione di EMB è stata analizzata nel contesto del rimodellamento tissutale e del metabolismo disfunzionale, rendendola rilevante per studi sull’adattamento metabolico associato ai tumori e sulle interazioni con il microambiente. La sua localizzazione in superficie e il suo comportamento di associazione con partner molecolari supportano indagini meccanicistiche sulla regolazione dei trasportatori e sulle vie dipendenti dall’adesione.
Embigin Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus EMB nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di EMB. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di EMB. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con EMB interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.