EGFL6 Plasmide Double Nickase (h): sc-411850-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- EGFL6 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il EGFL6 Double Nickase Plasmid (h) e il EGFL6 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira EGFL6. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
EGFL6 Plasmide Double Nickase (h) | sc-411850-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
EGFL6 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-411850-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EGFL6 codifica la proteina 6 simile al fattore di crescita epidermico, un fattore secreto associato alla matrice extracellulare, particolarmente arricchito in contesti vascolari e dello sviluppo. Contribuisce alle interazioni cellula–matrice, al comportamento delle cellule endoteliali e stromali e alla regolazione di migrazione e adesione attraverso reti di segnalazione che intersecano le vie mediate dalle integrine e i programmi responsivi ai fattori di crescita. L’espressione di EGFL6 è stata associata al rimodellamento tissutale e a processi angiogenici, frequentemente alterati nei microambienti tumorali e in altre patologie che coinvolgono una vascolarizzazione aberrante. Di conseguenza, EGFL6 è comunemente studiato per i suoi ruoli nella segnalazione extracellulare, nell’organizzazione della matrice e nella modulazione di fenotipi proliferativi e di motilità in modelli cellulari umani.
EGFL6 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus EGFL6 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di EGFL6. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di EGFL6. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con EGFL6 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.