Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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E2F-8 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406972
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- E2F-8 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico E2F-8, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: E2F-8 Antibody (B-9): sc-514064
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
E2F-8 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-406972 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
E2F8 codifica E2F-8, un membro atipico della famiglia dei fattori di trascrizione E2F che agisce principalmente come repressore trascrizionale, controllando la progressione del ciclo cellulare e la tempistica della replicazione del DNA. E2F-8 partecipa a reti regolate da RB/E2F, coordina l’espressione genica della fase S e contribuisce al mantenimento della stabilità genomica attraverso la regolazione di programmi proliferativi. Svolge ruoli nel controllo della crescita durante lo sviluppo e nelle decisioni di destino cellulare, e un’espressione alterata di E2F8 è stata collegata alla proliferazione deregolata osservata in diversi contesti tumorali. Poiché E2F-8 interagisce con vie fondamentali associate ai checkpoint e alla replicazione, rappresenta un nodo utile per studiare il controllo trascrizionale dell’ingresso nel ciclo cellulare e le risposte allo stress replicativo.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO E2F-8 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene E2F8 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del E2F8 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto E2F8 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina E2F-8.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di E2F8 per lo studio della segnalazione di E2F-8, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni E2F8 critici per la funzione di E2F-8
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di E2F8 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal E2F-8 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal E2F-8 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus E2F8. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal E2F-8 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR E2F-8 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia E2F8 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio E2F8 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.