E-cadherin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (canine): sc-437341
- Especies Diana: canine
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- E-cadherin El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (canine) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico E-cadherin, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
E-cadherin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (canine) | sc-437341 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
La E-cadherina (CDH1) es una glicoproteína de adhesión célula–célula dependiente de calcio que media la formación de uniones adherentes y la integridad del tejido epitelial en células caninas. Mediante su asociación citoplasmática con las cateninas, la E-cadherina se conecta con el citoesqueleto de actina y regula la polaridad epitelial, la inhibición por contacto y la función de barrera. La pérdida o desregulación de la E-cadherina altera la señalización de las uniones y puede promover programas de transición epitelio-mesenquimal (EMT), con efectos posteriores sobre la señalización Wnt/β-catenina y fenotipos relacionados con la migración y la invasión. La expresión alterada de E-cadherina y la arquitectura de las uniones se estudian con frecuencia en el contexto de la progresión tumoral, la fibrosis y la remodelación inflamatoria en tejidos epiteliales.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO E-cadherin (canine) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen en líneas celulares canine. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína E-cadherin.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en para la investigación de la señalización de E-cadherin, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de críticos para la función de E-cadherin
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido E-cadherin CRISPR/Cas9 KO (canine) y el plásmido E-cadherin CRISPR/Cas9 KO (canine2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus . Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR E-cadherin (canine) y el plásmido HDR E-cadherin (canine2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.