DUOX2 Plasmide Double Nickase (m): sc-431951-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- DUOX2 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il DUOX2 Double Nickase Plasmid (m) e il DUOX2 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Duox2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: DUOX2 Antibody (E-8): sc-398681
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
DUOX2 Plasmide Double Nickase (m) | sc-431951-NIC | 20 µg | $410.00 |
Duox2 codifica la dual ossidasi 2 (DUOX2), un’ossidasi NADPH transmembrana che genera perossido di idrogeno sulle superfici epiteliali e fornisce il substrato per reazioni antimicrobiche dipendenti dalla lattoperossidasi. Nei tessuti murini come la tiroide e le mucose, le specie reattive dell’ossigeno derivate da DUOX2 supportano la segnalazione redox, la difesa immunitaria innata e i processi ormonogenici, collegando l’attività di DUOX2 a vie responsive allo stress ossidativo e a programmi infiammatori. Un’alterazione della funzione di DUOX2 è stata associata a una regolazione anomala della biologia della barriera epiteliale e a un’omeostasi aberrante delle ROS in modelli di infiammazione mucosale e di disormonogenesi tiroidea.
DUOX2 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Duox2 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Duox2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Duox2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Duox2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.