DTX3L Plasmide Double Nickase (m): sc-431621-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- DTX3L Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il DTX3L Double Nickase Plasmid (m) e il DTX3L Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Dtx3l. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
DTX3L Plasmide Double Nickase (m) | sc-431621-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DTX3L Plasmide Double Nickase (m2) | sc-431621-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DTX3L (deltex E3 ubiquitin ligase 3L) è una ligasi E3 dell’ubiquitina di tipo RING che collabora con PARP9 per regolare la segnalazione mediata dall’ubiquitina associata alle risposte al danno al DNA e alle vie stimolate dall’interferone. Attraverso la modulazione dell’ubiquitinazione delle proteine, DTX3L influenza processi associati alla cromatina, programmi trascrizionali e la segnalazione dello stress cellulare che plasmano gli output dell’immunità innata. Il gene murino Dtx3l è stato studiato in contesti di segnalazione infiammatoria e di interazioni ospite–patogeno, in cui la regolazione mediata dall’ubiquitina può influenzare la funzione delle cellule immunitarie e le reti guidate dalle citochine. La deregolazione dell’ubiquitinazione e delle vie dipendenti da PARP collegate a DTX3L è inoltre rilevante per i meccanismi di stabilità del genoma e per la biologia dello stress oncogenico.
DTX3L Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Dtx3l nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Dtx3l. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Dtx3l. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Dtx3l interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.