DMBT1 Plasmide Double Nickase (h): sc-402615-NIC

DMBT1 (deleted in malignant brain tumors 1) codifica una glicoproteina secreta, multidominio, appartenente alla famiglia dei recettori scavenger ricchi in cisteina (SRCR), implicata nella difesa dell’ospite a livello epiteliale e nell’omeostasi delle mucose. La proteina partecipa al riconoscimento di pattern, all’agglutinazione dei microrganismi e alla modulazione della segnalazione infiammatoria, con ruoli descritti nella differenziazione epiteliale e in processi associati alla funzione di barriera. L’espressione di DMBT1 è regolata in risposta a lesioni tissutali e stimoli immunitari ed è stata collegata a vie che coinvolgono l’immunità innata, le interazioni con la matrice extracellulare e l’adesione cellula-cellula. Un’alterazione dell’espressione di DMBT1 o la sua perdita genomica è stata associata a diverse patologie epiteliali e alla biologia tumorale, a supporto della sua utilità come bersaglio di ricerca nei meccanismi legati a infiammazione, biologia delle infezioni e cancro.

DMBT1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus DMBT1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di DMBT1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di DMBT1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con DMBT1 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.