DIP2C Plasmide Double Nickase (h): sc-411642-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- DIP2C Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il DIP2C Double Nickase Plasmid (h) e il DIP2C Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira DIP2C. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
DIP2C Plasmide Double Nickase (h) | sc-411642-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DIP2C Plasmide Double Nickase (h2) | sc-411642-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DIP2C (disco-interacting protein 2 omologo C) codifica una proteina nucleare implicata nella regolazione dell’espressione genica associata alla cromatina e nei programmi di differenziamento cellulare. Studi funzionali riportati collegano le proteine della famiglia DIP2 a processi associati alla metilazione del DNA e a vie di sviluppo neuronale, suggerendo un ruolo nel mantenimento degli stati trascrizionali durante le decisioni di destino cellulare. Un’alterazione dell’espressione di DIP2C e perturbazioni genomiche sono state osservate in molteplici dataset tumorali, a supporto del suo studio in biologia del cancro, stabilità del genoma e disregolazione epigenetica. Di conseguenza, DIP2C è spesso analizzato in modelli di controllo della proliferazione, impegno di linea e rimodellamento delle reti trascrizionali.
DIP2C Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus DIP2C nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di DIP2C. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di DIP2C. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con DIP2C interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.