DHRS1 Plasmide Double Nickase (h): sc-414077-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- DHRS1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il DHRS1 Double Nickase Plasmid (h) e il DHRS1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira DHRS1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
DHRS1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-414077-NIC | 20 µg | $410.00 |
DHRS1 (deidrogenasi/riduttasi 1) codifica una deidrogenasi/riduttasi citosolica a catena corta che catalizza reazioni redox dipendenti da NAD(P)H, contribuendo al metabolismo cellulare dei composti carbonilici e al mantenimento dell’equilibrio redox. Modulando l’interconversione di aldeidi, chetoni e metaboliti correlati derivati da lipidi e steroidi, DHRS1 può influenzare l’omeostasi metabolica e le risposte allo stress ossidativo. Alterazioni dell’espressione o dell’attività degli enzimi SDR sono state associate a una deregolazione del metabolismo lipidico e della segnalazione redox in contesti patologici umani, inclusa la riprogrammazione metabolica associata al cancro. DHRS1 viene quindi studiato in vie che collegano stress ossidativo, funzione mitocondriale e regolazione della crescita e della differenziazione cellulare mediata dai metaboliti.
DHRS1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus DHRS1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di DHRS1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di DHRS1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con DHRS1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.