Dermatopontin Plasmide Double Nickase (h): sc-402924-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Dermatopontin Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Dermatopontin Double Nickase Plasmid (h) e il Dermatopontin Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira DPT. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Dermatopontin Antibody (F-4): sc-376863
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Dermatopontin Plasmide Double Nickase (h) | sc-402924-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Dermatopontin Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402924-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano DPT codifica la dermatopontina, una proteina della matrice extracellulare arricchita nei tessuti connettivi che modula la fibrillogenesi del collagene, l’assemblaggio della matrice e l’adesione cellula–matrice. La dermatopontina influenza il crosstalk di segnalazione tra la matrice extracellulare e le cellule, incidendo su processi quali la riparazione delle ferite, l’attività dei fibroblasti e il rimodellamento tissutale attraverso interazioni con componenti della matrice e vie di fattori di crescita. Un’espressione alterata di DPT è stata associata a rimodellamento correlato alla fibrosi e a cambiamenti del microambiente tumorale, in cui l’organizzazione e la rigidità della matrice extracellulare possono influenzare il comportamento cellulare. In quanto regolatore della matrice, DPT è spesso studiato nei meccanismi che governano la biologia dello stroma, l’angiogenesi e le risposte infiammatorie legate al turnover della matrice extracellulare.
Dermatopontin Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus DPT nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di DPT. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di DPT. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con DPT interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.