Dermatopontin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402924
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Dermatopontin O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Dermatopontin, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Dermatopontin Anticorpo (F-4): sc-376863
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Dermatopontin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402924 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
DPT codifica a dermatopontina, uma proteína da matriz extracelular rica em tirosina que se liga ao colágeno e modula a organização da matriz, a adesão celular e a sinalização célula–matriz. A dermatopontina influencia a montagem e o remodelamento da matriz extracelular ao afetar a fibrilogênese do colágeno e ao interagir com vias reguladas por fatores de crescimento, incluindo respostas associadas ao TGF-β que moldam a atividade dos fibroblastos. Alterações na expressão de DPT têm sido associadas ao remodelamento fibrótico, à dinâmica de cicatrização de feridas e a mudanças estromais observadas em múltiplos contextos patológicos. Como componente estromal da MEC, a dermatopontina também é relevante para estudar como sinais do microambiente regulam a migração celular, a mecanotransdução e a arquitetura tecidual.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Dermatopontin (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene DPT em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do DPT, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do DPT na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Dermatopontin.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de DPT para a investigação da sinalização de Dermatopontin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) DPT críticos para a função Dermatopontin
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos DPT para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Dermatopontin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Dermatopontin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus DPT. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Dermatopontin Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Dermatopontin (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia DPT para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo DPT definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.