Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Delta Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400790
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Delta O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Delta, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Delta Anticorpo (G-1): sc-377310
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Delta Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400790 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
DLL1 codifica o ligante humano Delta-like 1 (Delta), um ativador de receptores Notch ancorado à membrana que medeia sinalização justácrina para controlar decisões de destino celular, o padrão de formação dos tecidos e a manutenção de células-tronco/progenitoras. A interação DLL1–NOTCH desencadeia a liberação proteolítica do domínio intracelular de Notch e programas transcricionais via RBPJ/CSL que influenciam diferenciação, proliferação e apoptose. Essa via se cruza com programas de desenvolvimento e sinais do microambiente, e sua desregulação é frequentemente estudada em contextos como biologia tumoral, neurogênese e desenvolvimento de células imunes. A expressão de DLL1 e a dinâmica de sua sinalização também são relevantes para transições epitélio–mesênquima e para a regulação da angiogênese, por meio de um equilíbrio coordenado entre ligantes e receptores de Notch.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Delta (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene DLL1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do DLL1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do DLL1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Delta.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de DLL1 para a investigação da sinalização de Delta, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) DLL1 críticos para a função Delta
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos DLL1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Delta Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Delta Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus DLL1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Delta Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Delta (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia DLL1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo DLL1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.