DAX-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419053

Descripción general

Nr0b1 codifica DAX-1 (NR0B1), un receptor nuclear huérfano atípico que actúa principalmente como corre regulador transcripcional en tejidos esteroidogénicos y reproductivos. DAX-1 modula las redes de señalización de receptores nucleares al reprimir o ajustar con precisión programas transcripcionales controlados por factores como SF-1/NR5A1, influyendo así en la biosíntesis de hormonas esteroideas, el desarrollo suprarrenal y la regulación del eje hipotálamo–hipófisis–gónadas. En modelos murinos, la alteración de la actividad de DAX-1 afecta la diferenciación gonadal, la gametogénesis y la homeostasis endocrina, lo que convierte a Nr0b1 en un nodo relevante para estudiar la regulación génica del desarrollo y el control de las vías esteroidogénicas. La desregulación de ortólogos de NR0B1 se ha vinculado con fenotipos suprarrenales y reproductivos congénitos, lo que respalda su uso en estudios mecanísticos del desarrollo endocrino y de las vías de determinación sexual.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO DAX-1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Nr0b1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Nr0b1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Nr0b1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína DAX-1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Nr0b1 para la investigación de la señalización de DAX-1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Nr0b1 críticos para la función de DAX-1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Nr0b1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido DAX-1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido DAX-1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Nr0b1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR DAX-1 (m) y el plásmido HDR DAX-1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Nr0b1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Nr0b1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.