Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
DACH1 Plasmide Double Nickase (h): sc-404712-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- DACH1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il DACH1 Double Nickase Plasmid (h) e il DACH1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira DACH1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: DACH1 Antibody (A-6): sc-398706
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
DACH1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-404712-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DACH1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404712-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DACH1 (fattore di trascrizione 1 della famiglia dachshund) è un regolatore trascrizionale nucleare legante il DNA che modula le decisioni di destino cellulare durante lo sviluppo e mantiene programmi di differenziamento specifici di tessuto nelle cellule adulte. Influenza reti di espressione genica legate al controllo del ciclo cellulare, all’equilibrio epitelio–mesenchimale e alla specificazione di linea attraverso interazioni con cofattori e complessi di regolazione della cromatina. L’attività di DACH1 è stata collegata a vie che governano proliferazione e migrazione, includendo interazioni (crosstalk) con la segnalazione dei recettori ormonali e con programmi trascrizionali responsivi ai fattori di crescita. Un’alterazione dell’espressione di DACH1 o del suo contesto regolatorio è stata riportata in molteplici tipi di tumore ed è rilevante anche per studi di organogenesi e di fenotipi congeniti di patterning.
DACH1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus DACH1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di DACH1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di DACH1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con DACH1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.