Plásmido Doble Nickase (h) CysLT1 Receptor: sc-416516-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)CysLT1 Receptor consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CysLT1 Receptor (h) y el plásmido de doble nickasa CysLT1 Receptor (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CYSLTR1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) CysLT1 Receptor | sc-416516-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) CysLT1 Receptor | sc-416516-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CYSLTR1 codifica el receptor humano 1 de leucotrienos cisteinílicos (receptor CysLT1), un GPCR de clase A que se une a LTC4, LTD4 y LTE4 para iniciar la señalización Gαq/PLCβ, la movilización de Ca2+ intracelular y la activación posterior de MAPK. La activación del receptor favorece la activación de células inflamatorias, la contracción del músculo liso y la modulación de la permeabilidad vascular, vinculando a CYSLTR1 con respuestas inmunitarias innatas y adaptativas impulsadas por leucotrienos. La actividad de CYSLTR1 se integra con el metabolismo del ácido araquidónico y las redes de señalización de eicosanoides, y puede influir en la producción de citocinas y la quimiotaxis. La desregulación de la señalización del receptor CysLT1 se ha asociado con fenotipos inflamatorios crónicos, hiperreactividad de la vía aérea e inflamación asociada a tumores, lo que lo convierte en una diana útil para estudios mecanísticos de las vías de los leucotrienos.
CysLT1 Receptor El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CYSLTR1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CYSLTR1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CYSLTR1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CYSLTR1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.