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Cyr61/CCN1双切口酶质粒(h) | sc-400366-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Cyr61/CCN1双切口酶质粒(h2) | sc-400366-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CYR61(Cyr61/CCN1)编码一种基质细胞蛋白(matricellular)、可分泌的 CCN 家族蛋白,能够将细胞外基质(ECM)信号与细胞表面受体整合起来,从而调控细胞黏附、迁移、增殖与存活。Cyr61/CCN1 通过整合素(integrin)与硫酸乙酰肝素(heparan sulfate)依赖的信号传导发挥作用,并调节包括黏着斑/FAK、MAPK/ERK 和 PI3K/AKT 在内的下游通路,将机械性与炎症性微环境输入连接到基因表达程序。在人体组织中,CYR61 表达异常与血管生成、创伤修复、纤维化以及肿瘤-基质相互作用相关,因此对于研究细胞外基质重塑与情境依赖性信号具有重要意义。这些特性也支持将其作为研究细胞-基质通讯、内皮细胞反应以及应激诱导转录网络的关键节点。
Cyr61/CCN1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CYR61 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CYR61内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CYR61的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CYR61基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。