CYP4F3 Plasmide Double Nickase (h): sc-410873-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CYP4F3 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CYP4F3 Double Nickase Plasmid (h) e il CYP4F3 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CYP4F3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CYP4F3 Plasmide Double Nickase (h) | sc-410873-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CYP4F3 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-410873-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CYP4F3 codifica una ω-idrossilasi del citocromo P450 che catalizza l’inattivazione ossidativa di mediatori lipidici, tra cui il leucotriene B4 e altri eicosanoidi correlati. Attraverso il controllo di questi substrati, CYP4F3 contribuisce alla regolazione della segnalazione infiammatoria, della chemiotassi dei neutrofili e delle vie di risoluzione collegate al metabolismo dell’acido arachidonico. L’enzima è inoltre coinvolto nell’ossidazione degli acidi grassi e nell’omeostasi redox all’interno del sistema P450 del reticolo endoplasmatico. Alterazioni dell’attività o dell’espressione di CYP4F3 sono state associate a un turnover degli eicosanoidi deregolato osservato in condizioni infiammatorie e a variazioni dei fenotipi di metabolismo di farmaci e xenobiotici rilevanti per la ricerca farmacologica.
CYP4F3 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CYP4F3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CYP4F3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CYP4F3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CYP4F3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.