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Cyclophilin F双切口酶质粒(h) | sc-402902-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Cyclophilin F双切口酶质粒(h2) | sc-402902-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PPIF 编码环孢素蛋白 F(cyclophilin F),这是一种定位于线粒体的肽基脯氨酰顺反异构酶,在基质及内膜环境中支持蛋白质折叠与蛋白稳态。环孢素蛋白 F 参与调控线粒体通透性转换以及氧化应激反应,因此与线粒体膜电位的维持、活性氧(ROS)处理和与细胞凋亡相关的信号传导相联系。通过这些过程,PPIF 与能量代谢和细胞存活通路发生交叉,而这些通路常在线粒体相关的神经退行性病变、缺血-再灌注损伤模型以及癌症相关的线粒体重塑中受到扰动。因此,研究者常通过改变 PPIF 的活性来探究在线粒体应激背景下,炎症反应与细胞死亡程序如何在人体细胞系统中被整合与调控。
Cyclophilin F 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 PPIF 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对PPIF内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏PPIF的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了PPIF基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。