Cyclophilin 40 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-426720
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Cyclophilin 40 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Cyclophilin 40, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Cyclophilin 40 Anticorpo (C-11): sc-137216
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Cyclophilin 40 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-426720 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Ppid codifica a ciclofilina 40 (Cyp40), uma isomerase peptidil-prolil cis–trans que atua como co-chaperona com domínio TPR em complexos HSP90/HSP70. Ao facilitar a maturação conformacional e a montagem de proteínas cliente, a Cyp40 influencia a proteostase, a sinalização de receptores de esteroides e vias responsivas ao estresse ligadas ao dobramento proteico e ao controle de qualidade. O Ppid também tem sido associado à regulação do manejo de proteínas mitocondriais e à suscetibilidade à apoptose por mecanismos dependentes de chaperonas. A desregulação de redes chaperona–imunofilina é frequentemente estudada em contextos de neurodegeneração, inflamação e estresse do proteoma associado ao câncer, tornando o Ppid um nó útil para investigações mecanísticas em sistemas murinos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Cyclophilin 40 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ppid em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ppid, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ppid na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Cyclophilin 40.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ppid para a investigação da sinalização de Cyclophilin 40, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ppid críticos para a função Cyclophilin 40
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ppid para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Cyclophilin 40 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Cyclophilin 40 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ppid. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Cyclophilin 40 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Cyclophilin 40 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ppid para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ppid definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.