cyclin G2 Plasmide Double Nickase (h): sc-403620-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- cyclin G2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il cyclin G2 Double Nickase Plasmid (h) e il cyclin G2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CCNG2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: cyclin G2 Antibody (1F9-C11): sc-293302
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
cyclin G2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-403620-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
cyclin G2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403620-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CCNG2 codifica la ciclina G2, una ciclina atipica frequentemente indotta da segnali che inibiscono la crescita e che contribuisce alla regolazione negativa della progressione del ciclo cellulare, in particolare in prossimità della transizione G1/S. La ciclina G2 interagisce con vie di segnalazione responsiva allo stress e può modulare il controllo dei checkpoint e la proliferazione cellulare attraverso interazioni che influenzano l’attività delle fosfatasi e i percorsi dipendenti dalla fosforilazione. Un’alterata espressione di CCNG2 è stata associata a programmi di proliferazione e differenziamento deregolati, rendendola rilevante per studi di biologia tumorale, omeostasi tissutale e soppressione della crescita dipendente dal contesto. Il suo ruolo regolatorio la collega anche a risposte cellulari quali la senescenza e l’adattamento a stress genotossico o metabolico.
cyclin G2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CCNG2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CCNG2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CCNG2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CCNG2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.