cyclin G1 Plasmide Double Nickase (h): sc-402045-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- cyclin G1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il cyclin G1 Double Nickase Plasmid (h) e il cyclin G1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CCNG1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: cyclin G1 Antibody (F-5): sc-8016
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
cyclin G1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-402045-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
cyclin G1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402045-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CCNG1 codifica la ciclina G1, una ciclina atipica regolata trascrizionalmente da p53 che coordina il controllo del ciclo cellulare con le risposte cellulari allo stress. La ciclina G1 partecipa alla regolazione dei checkpoint e alla modulazione delle reti di fosforilazione proteica, incluse interazioni che influenzano il feedback MDM2–p53 e la segnalazione associata a fosfatasi, come i complessi legati a PP2A. Attraverso queste vie, CCNG1 influisce su proliferazione, stabilità genomica e risposte al danno al DNA, risultando quindi rilevante per studi di biologia tumorale, resistenza allo stress genotossico e regolazione aberrante del ciclo cellulare in contesti di malattia umana. Alterazioni dell’espressione o della regolazione di CCNG1 sono state osservate in molteplici tipi di cancro, supportandone l’impiego come nodo meccanicistico per analizzare la segnalazione di adattamento allo stress.
cyclin G1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CCNG1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CCNG1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CCNG1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CCNG1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.