CUZD1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-421190

Panoramica

Cuzd1 codifica CUZD1, una proteina con domini CUB e simili alla zona pellucida implicata nella biologia delle cellule epiteliali e nella funzione delle ghiandole secretorie, con ruoli riportati nell’elaborazione delle proteine e nella secrezione regolata. Nei tessuti murini, l’espressione di CUZD1 è arricchita negli epiteli ghiandolari ed è stata collegata a vie che governano la differenziazione cellulare, il rimodellamento tissutale e le risposte a segnali infiammatori. Un’alterata regolazione di CUZD1 è stata associata a cambiamenti dell’omeostasi epiteliale e dei programmi proliferativi, rendendola rilevante per studi meccanicistici dei tessuti di barriera e della fisiologia degli organi esocrini. In quanto modulatore dipendente dal contesto dello stato cellulare, CUZD1 offre un punto di accesso per analizzare reti geniche che collegano la funzione secretoria ai segnali di crescita e di stress.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO CUZD1 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Cuzd1 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Cuzd1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Cuzd1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina CUZD1.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Cuzd1 per lo studio della segnalazione di CUZD1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Cuzd1 critici per la funzione di CUZD1
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Cuzd1 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal CUZD1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal CUZD1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Cuzd1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal CUZD1 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR CUZD1 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Cuzd1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Cuzd1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.