Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
CUZD1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-407311
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CUZD1 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico CUZD1, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CUZD1 Antibody (E-10): sc-514578
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CUZD1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-407311 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
CUZD1 (domini CUB e “zona pellucida-like” 1) codifica una proteina secreta e associata alla membrana, implicata nella differenziazione delle cellule epiteliali e nell’omeostasi dei tessuti secretori. CUZD1 partecipa a processi legati al traffico proteico e alla secrezione regolata ed è stata collegata a programmi trascrizionali a valle della segnalazione citochinica, incluse vie associate all’attività JAK/STAT negli epiteli ghiandolari. Un’alterazione dell’espressione di CUZD1 è stata riportata in neoplasie di origine epiteliale e in stati infiammatori, sostenendone l’utilizzo come nodo molecolare per studiare transizioni di stato cellulare, risposte allo stress e fenotipi associati al tumore. Nei sistemi modello umani, CUZD1 rappresenta un bersaglio maneggevole per analizzare i meccanismi di rimodellamento epiteliale e gli output di segnalazione dipendenti dal contesto.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO CUZD1 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene CUZD1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del CUZD1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto CUZD1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina CUZD1.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di CUZD1 per lo studio della segnalazione di CUZD1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni CUZD1 critici per la funzione di CUZD1
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di CUZD1 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal CUZD1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal CUZD1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus CUZD1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal CUZD1 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR CUZD1 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia CUZD1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio CUZD1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.