CTP CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-417472

개요

SLC25A1은 미토콘드리아 시트르산 수송체 단백질(CTP)을 암호화하며, CTP는 내막에 존재하는 운반체로서 시트르산/아이소시트르산과 말산을 교환해 미토콘드리아 대사와 세포질의 생합성 프로그램을 연결합니다. CTP는 ATP-시트르산 분해효소(ATP-citrate lyase)에 의한 아세틸-CoA 생성에 쓰일 시트르산을 세포질로 내보냄으로써, 신규 지질 합성(de novo lipid synthesis), 단백질 아세틸화, 후성유전적 조절을 뒷받침하며, 하위 NADPH 생성 경로를 통해 산화환원 균형에도 영향을 줍니다. SLC25A1의 활성은 TCA 회로, 해당과정, 보충대사 유입(anaplerotic flux)을 포함한 중심 탄소 대사와 통합되어, 영양분 가용성과 미토콘드리아 스트레스에 대한 세포 반응을 형성합니다. 시트르산 수송의 조절 이상은 암, 신경발달 장애, 염증 신호전달 환경에서 관찰되는 대사 재편성과 연관되어 왔으며, SLC25A1은 미토콘드리아–세포질 간 상호작용을 기전적으로 연구하는 데 유용한 핵심 지점으로 간주됩니다.

CTP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 SLC25A1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 SLC25A1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 SLC25A1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 CTP 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 CTP 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 SLC25A1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• CTP 기능에 중요한 SLC25A1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 SLC25A1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• CTP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 CTP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 SLC25A1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  CTP HDR 플라스미드 (h) 및 CTP HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 SLC25A1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 SLC25A1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.