Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CTGF Plasmide Double Nickase (h): sc-400091-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CTGF Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CTGF Double Nickase Plasmid (h) e il CTGF Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CTGF. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CTGF Antibody (E-5): sc-365970
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CTGF Plasmide Double Nickase (h) | sc-400091-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CTGF Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400091-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il fattore di crescita del tessuto connettivo (CTGF/CCN2) è una proteina matricellulare secreta che modula le interazioni cellula–matrice, la proliferazione, la migrazione e la deposizione della matrice extracellulare (ECM). Agisce a valle della segnalazione TGF-β/SMAD e integra segnali provenienti dalle integrine, da MAPK e dalle vie di meccanotrasduzione YAP/TAZ per coordinare l'attivazione dei fibroblasti e il rimodellamento tissutale. Un'espressione deregolata di CTGF è associata a programmi fibrotici e a un rimodellamento stromale aberrante, con ampia rilevanza sia per la biologia della fibrosi d'organo sia per la ricerca sul microambiente tumorale. In vitro, CTGF viene comunemente studiato per il suo ruolo nella differenziazione in miofibroblasti, nella sintesi di collagene, nelle risposte angiogeniche e nella regolazione del crosstalk con le cellule infiammatorie nei tessuti in rimodellamento.
CTGF Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CTGF nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CTGF. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CTGF. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CTGF interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.