COX11 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-405874

Übersicht

COX11 kodiert ein Protein der inneren Mitochondrienmembran, das für die Biogenese der Cytochrom-c-Oxidase (Komplex IV) erforderlich ist. Es fungiert als Kupfer-Metallochaperon und unterstützt die Bereitstellung von Kupfer für den katalytischen Kern von COX1. Über diese Funktion trägt COX11 zur oxidativen Phosphorylierung, zum Elektronentransport und zur zellulären ATP-Produktion bei, mit nachgelagerten Effekten auf das mitochondriale Membranpotenzial und die Redox-Homöostase. Eine Störung der COX11-abhängigen Assemblierung kann die respiratorische Kapazität beeinträchtigen und sekundäre Veränderungen in der Signalübertragung reaktiver Sauerstoffspezies (ROS) sowie in metabolischen Stressantworten begünstigen. Eine veränderte Komplex-IV-Funktion und die mitochondriale Proteostase werden häufig im Zusammenhang mit neuromuskulären und neurodegenerativen Phänotypen sowie mit der metabolischen Umprogrammierung von Krebszellen untersucht.

Das COX11 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des COX11-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des COX11-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von COX11 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die COX11-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von COX11-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der COX11-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf COX11-Exone abzielen, die für die COX11-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere COX11-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom COX11 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom COX11 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des COX11-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das COX11 HDR-Plasmid (h) und COX11 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von COX11-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten COX11-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.