Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Cortactin Plasmide Double Nickase (h): sc-400761-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Cortactin Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Cortactin Double Nickase Plasmid (h) e il Cortactin Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CTTN. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Cortactin Antibody (H-5): sc-55579
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Cortactin Plasmide Double Nickase (h) | sc-400761-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Cortactin Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400761-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CTTN codifica per la cortactina, una proteina di impalcatura legante l’actina che coordina la ramificazione dell’actina dipendente da Arp2/3 e stabilizza reti dinamiche di actina corticale. Collegando l’assemblaggio dei filamenti a moduli di segnalazione, la cortactina supporta la formazione di lamellipodi, l’endocitosi e la maturazione degli invadopodi, integrando segnali dalle chinasi della famiglia Src e dalle vie delle Rho GTPasi per regolare adesione e motilità. Alterazioni del dosaggio di CTTN o del suo stato di fosforilazione sono state associate a un rimodellamento citoscheletrico deregolato e a fenotipi invasivi, rendendolo rilevante per studi sulla migrazione delle cellule tumorali e sulla segnalazione associata alla metastasi. La cortactina contribuisce inoltre al traffico di membrana e al turnover dei recettori, collegando la dinamica dell’actina agli output della segnalazione dei fattori di crescita.
Cortactin Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CTTN nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CTTN. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CTTN. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CTTN interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.