Contactin 3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-422111

概要

Cntn3は、神経系に豊富に発現するGPIアンカー型の免疫グロブリンスーパーファミリーに属する細胞接着分子であるコンタクチン3をコードしており、神経突起の伸長、軸索誘導、シナプス構築を支えます。コンタクチン3は神経細胞表面で、コンタクチン–L1ファミリーや受容体との相互作用に関与し、発生および成熟過程における細胞間認識と神経回路の組み立てを形作ります。接着依存性シグナル伝達や膜マイクロドメインの編成に関わる役割を通じて、CNTN3は神経発達性・精神神経疾患に関連する表現型とも関係する、結合性や可塑性のプログラムに影響を及ぼします。そのため、マウスCntn3は、配線特異性の分子決定因子や活動依存的なネットワーク再編を解明するための有用な切り口となります。

Contactin 3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるCntn3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Cntn3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Cntn3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Contactin 3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Contactin 3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Cntn3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Contactin 3の機能に不可欠なCntn3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Cntn3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Contactin 3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびContactin 3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Cntn3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Contactin 3 HDRプラスミド（m）および Contactin 3 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCntn3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCntn3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。