CNBP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419712
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CNBP O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CNBP, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CNBP Anticorpo (H-7): sc-515387
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CNBP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419712 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Cnbp codifica a proteína de ligação a ácidos nucleicos celular (CNBP), uma proteína conservada do tipo “zinc-finger” que se liga a DNA e RNA de fita simples para regular a transcrição e a tradução. A CNBP participa do metabolismo de ácidos nucleicos e do controle de programas de expressão gênica ligados ao crescimento celular, às respostas ao estresse e à sinalização relacionada ao sistema imune. Ela tem sido implicada na regulação de elementos ricos em guanina (G) e na modulação de vias que influenciam a expressão de citocinas e a diferenciação celular. Alterações na função da CNBP estão associadas a estados de expressão gênica desregulados relevantes para fenótipos neuromusculares e inflamatórios, o que a torna um alvo útil para estudos mecanísticos em modelos murinos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CNBP (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Cnbp em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Cnbp, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Cnbp na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CNBP.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Cnbp para a investigação da sinalização de CNBP, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Cnbp críticos para a função CNBP
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Cnbp para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CNBP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo CNBP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Cnbp. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CNBP Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR CNBP (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Cnbp para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Cnbp definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.