CNBP Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-419712

Panoramica

Cnbp codifica la cellular nucleic acid binding protein (CNBP), una proteina conservata a dita di zinco che si lega al DNA e all’RNA a singolo filamento per regolare trascrizione e traduzione. CNBP partecipa al metabolismo degli acidi nucleici e al controllo di programmi di espressione genica legati alla crescita cellulare, alle risposte allo stress e alla segnalazione di tipo immunitario. È stata implicata nella regolazione di elementi ricchi in guanina (G-rich) e nella modulazione di vie che influenzano l’espressione di citochine e la differenziazione cellulare. Alterazioni della funzione di CNBP sono associate a stati di espressione genica deregolati rilevanti per fenotipi neuromuscolari e infiammatori, rendendola un nodo utile per studi meccanicistici in modelli murini.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO CNBP (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Cnbp in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Cnbp insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Cnbp a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina CNBP.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Cnbp per lo studio della segnalazione di CNBP, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Cnbp critici per la funzione di CNBP
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Cnbp per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal CNBP CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal CNBP CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Cnbp. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal CNBP Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR CNBP (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Cnbp per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Cnbp definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.