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CKR-3双切口酶质粒(h) | sc-404160-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CKR-3双切口酶质粒(h2) | sc-404160-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CCR3(CKR-3)是一种G蛋白偶联趋化因子受体,可与嗜酸性粒细胞趋化蛋白(eotaxin)家族配体(如CCL11、CCL24和CCL26)结合,从而引导嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞以及部分Th2极化免疫细胞亚群的趋化、黏附与活化。配体结合后,CCR3与Gi蛋白偶联,调控细胞内钙离子通量、PI3K/AKT与MAPK信号传导、细胞骨架重塑,以及依赖整合素的跨内皮迁移。CCR3介导的白细胞募集会塑造黏膜与气道表面的炎症微环境,因此在过敏性炎症、哮喘及嗜酸性粒细胞相关疾病研究中被广泛关注。在慢性炎症状态和肿瘤相关免疫中,研究者也会考察CCR3活性与表达模式的改变,因为趋化因子梯度会影响免疫细胞浸润。
CKR-3 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CCR3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CCR3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CCR3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CCR3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。