CIITA Lentiviral Activation Particles (h): sc-401762-LAC

Humanes CIITA (class II, Haupthistokompatibilitätskomplex, Transaktivator) ist ein nicht an DNA bindender transkriptioneller Koaktivator, der als Masterregulator der MHC‑Klasse‑II‑Genexpression und der Antigenpräsentation dient. CIITA verknüpft die IFN‑γ/JAK‑STAT‑Signalübertragung mit Transkriptionsprogrammen, die HLA‑DP/DQ/DR, die Invarianten Kette (CD74) sowie akzessorische Komponenten der Antigenprozessierung steuern, und prägt so die adaptive Immunaktivierung in professionellen antigenpräsentierenden Zellen. Durch die Koordination von Chromatin-Remodeling und der Assembleierung des Enhanceosoms an MHC‑II‑Promotoren beeinflusst CIITA Immunüberwachung, Entzündungsreaktionen und Toleranz. Eine fehlregulierte CIITA‑Aktivität oder ‑Expression ist mit beeinträchtigter Antigenpräsentation und veränderten Tumor‑Immun‑Interaktionen verbunden und ist daher relevant für Studien zu Autoimmunität, Infektionsbiologie und Krebsimmunologie.

CIITA Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente CIITA-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

CIITA Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der CIITA-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen CIITA-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen CIITA-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.