Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ChemR23 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403033-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ChemR23O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ChemR23 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ChemR23 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CMKLR1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ChemR23 Anticorpo (H-6): sc-398769
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ChemR23 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403033-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ChemR23 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403033-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CMKLR1 codifica o ChemR23, um receptor acoplado à proteína G da classe A para o quimioatraente chemerina (RARRES2) e para ligantes lipídicos pró-resolução, como a resolvina E1. A sinalização do ChemR23 aciona vias dependentes de Gi, incluindo a inibição da adenilil ciclase, a ativação de MAPK/ERK, a mobilização de Ca2+ intracelular e o tráfego mediado por β-arrestina, modulando a quimiotaxia de leucócitos e as respostas de macrófagos/células dendríticas. Em tecidos humanos, o CMKLR1 contribui para a percepção de sinais inflamatórios e para a homeostase metabólica, conectando o recrutamento de células imunes à biologia do tecido adiposo e do sistema vascular. A atividade desregulada de CMKLR1/ChemR23 tem sido associada a doenças inflamatórias e a fenótipos cardiometabólicos, tornando-o relevante para estudos mecanísticos da comunicação entre imunidade e metabolismo.
ChemR23 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CMKLR1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CMKLR1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CMKLR1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CMKLR1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.