CHCHD10 Plasmide Double Nickase (m): sc-430459-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CHCHD10 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CHCHD10 Double Nickase Plasmid (m) e il CHCHD10 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Chchd10. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CHCHD10 Plasmide Double Nickase (m) | sc-430459-NIC | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino **Chchd10** codifica **CHCHD10**, una proteina con dominio coiled-coil-helix-coiled-coil-helix localizzata nei mitocondri, che supporta l’architettura mitocondriale e la fosforilazione ossidativa. È implicata nel mantenimento dell’integrità delle creste, nella regolazione delle prestazioni della catena respiratoria e nel coordinamento delle risposte mitocondriali allo stress che influenzano l’omeostasi energetica cellulare. La funzione di CHCHD10 si interseca con i processi di controllo qualità mitocondriale, inclusi proteostasi e dinamica mitocondriale, che modulano la suscettibilità allo stress metabolico e neurodegenerativo. Alterazioni della biologia di CHCHD10 sono state associate a fenotipi di disfunzione mitocondriale rilevanti per la ricerca neuromuscolare e sulla neurodegenerazione, rendendola utile per studi meccanicistici delle vie mitocondriali.
CHCHD10 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Chchd10 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Chchd10. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Chchd10. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Chchd10 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.