CES1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405773-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CES1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CES1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CES1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CES1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CES1 Anticorpo (A-11): sc-365249
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CES1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405773-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CES1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405773-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A carboxilesterase 1 (CES1) é uma hidrolase de serina altamente expressa no fígado humano que catalisa a hidrólise de uma ampla gama de lipídios endógenos e de ésteres, amidas e tioésteres xenobióticos. Ao regular a renovação de lipídios neutros e de metabólitos esterificados, a CES1 contribui para a homeostase lipídica e se interliga a processos metabólicos e de desintoxicação que moldam o equilíbrio redox celular e a sinalização inflamatória. Alterações na atividade ou na expressão da CES1 têm sido associadas à variabilidade interindividual no metabolismo de fármacos e a fenótipos metabólicos ligados à dislipidemia e a patologias relacionadas à esteatose hepática. Como resultado, a CES1 é amplamente utilizada como uma ferramenta molecular para estudar o metabolismo hepático, a biotransformação de compostos químicos e os mecanismos subjacentes à variabilidade de resposta a compostos em sistemas humanos.
CES1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CES1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CES1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CES1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CES1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.