Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ceruloplasmin Plasmide Double Nickase (h): sc-401798-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ceruloplasmin Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ceruloplasmin Double Nickase Plasmid (h) e il ceruloplasmin Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CP. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: ceruloplasmin Antibody (H-3): sc-365205
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ceruloplasmin Plasmide Double Nickase (h) | sc-401798-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ceruloplasmin Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401798-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano **CP** codifica la ceruloplasmina, una ferroxidasi multicupra che ossida Fe²⁺ a Fe³⁺ per facilitare il caricamento della transferrina e mantenere l’omeostasi del ferro a livello sistemico e cellulare. In quanto principale proteina plasmatica legante il rame, la ceruloplasmina integra il trasporto del rame con il controllo redox e limita la chimica del ferro pro-ossidante che può amplificare la produzione di specie reattive dell’ossigeno. L’attività di CP influisce sulla capacità antiossidante extracellulare e interagisce con le vie di traffico del ferro in epatociti, macrofagi e cellule del sistema nervoso centrale. Un’espressione o una funzione alterata della ceruloplasmina è associata a una distribuzione anomala del ferro e a fenotipi di stress ossidativo rilevanti per neurodegenerazione, disregolazione metabolica e stati infiammatori.
ceruloplasmin Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CP nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CP. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CP. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CP interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.