Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
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CEACAM1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-417666
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CEACAM1 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico CEACAM1, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CEACAM1 Antibody (E-1): sc-166453
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CEACAM1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-417666 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
CEACAM1 (molecola di adesione cellulare 1 correlata all’antigene carcinoembrionario) è una glicoproteina di superficie cellulare appartenente alla superfamiglia delle immunoglobuline, che media l’adesione omofilica ed eterofilica alle interfacce epiteliali ed endoteliali. Attraverso i suoi motivi citoplasmatici ITIM, CEACAM1 modula una segnalazione dipendente da fosfatasi, influenzando l’output delle vie MAPK e PI3K/AKT, l’organizzazione del citoscheletro e l’integrità delle giunzioni. Funziona inoltre come recettore di regolazione immunitaria sui leucociti, plasmando le soglie di attivazione e le risposte citochiniche nei microambienti infiammatori. Un’espressione deregolata di CEACAM1 e uno squilibrio tra le sue isoforme sono stati associati ad alterazioni della funzione di barriera, evasione immunitaria, rimodellamento angiogenico e fenotipi di progressione in numerosi tumori solidi e malattie infiammatorie.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO CEACAM1 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene CEACAM1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del CEACAM1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto CEACAM1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina CEACAM1.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di CEACAM1 per lo studio della segnalazione di CEACAM1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni CEACAM1 critici per la funzione di CEACAM1
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di CEACAM1 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal CEACAM1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal CEACAM1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus CEACAM1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal CEACAM1 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR CEACAM1 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia CEACAM1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio CEACAM1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.