CDK2AP2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406842

Panoramica

CDK2AP2 (proteina 2 associata a CDK2) è un regolatore legato al ciclo cellulare implicato nel controllo dell’attività di CDK2 e nel coordinamento della transizione G1/S con i programmi di replicazione del DNA. La proteina è associata a processi nucleari che influenzano la proliferazione, la dinamica della cromatina e il mantenimento dell’integrità del genoma, rendendola rilevante per studi sullo stress replicativo e sul controllo dei checkpoint. L’alterata regolazione delle vie dipendenti da CDK2AP2 è stata esplorata nel contesto della crescita cellulare deregolata e di fenotipi associati alla trasformazione, supportandone l’uso come strumento molecolare per interrogare i circuiti del ciclo cellulare. Nei modelli cellulari umani, la perturbazione di CDK2AP2 può aiutare a definire come le reti centrate su CDK2 si interfaccino con i moduli trascrizionali e di risposta al danno del DNA.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO CDK2AP2 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene CDK2AP2 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del CDK2AP2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto CDK2AP2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina CDK2AP2.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di CDK2AP2 per lo studio della segnalazione di CDK2AP2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni CDK2AP2 critici per la funzione di CDK2AP2
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di CDK2AP2 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal CDK2AP2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal CDK2AP2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus CDK2AP2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal CDK2AP2 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR CDK2AP2 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia CDK2AP2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio CDK2AP2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.