Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Cdc37 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-419584
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Cdc37 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico Cdc37, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Cdc37 Antibody (E-4): sc-13129
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Cdc37 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m) | sc-419584 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
Cdc37 (cell division cycle 37) codifica un co-chaperone conservato di HSP90 che stabilizza e favorisce la maturazione di un ampio insieme di chinasi proteiche, inclusi molti regolatori della segnalazione MAPK e PI3K–AKT. Coordinando il ripiegamento delle chinasi, l’assemblaggio dei complessi e la proteostasi, CDC37 influenza la progressione del ciclo cellulare, le risposte allo stress e la robustezza delle reti di segnalazione. L’alterazione della funzione di CDC37 può rimodellare i paesaggi della fosfo-segnalazione e modificare la dipendenza dalle vie chaperoniche, rendendolo rilevante per studi su fenotipi cellulari guidati da chinasi e sullo squilibrio della proteostasi. Cdc37 murino è quindi ampiamente utilizzato per indagare i circuiti chaperone–chinasi nello sviluppo, nell’omeostasi tissutale e in modelli di segnalazione rilevanti per la malattia.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Cdc37 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Cdc37 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Cdc37 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Cdc37 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Cdc37.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Cdc37 per lo studio della segnalazione di Cdc37, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni Cdc37 critici per la funzione di Cdc37
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Cdc37 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal Cdc37 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal Cdc37 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Cdc37. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal Cdc37 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR Cdc37 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Cdc37 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Cdc37 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.