Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Cdc20B Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406774
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Cdc20B El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Cdc20B, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Cdc20B Anticuerpo (2F2): sc-517066
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Cdc20B Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406774 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
CDC20B (ciclo de división celular 20B) codifica una proteína similar a Cdc20 que, según se predice, participa en la regulación asociada al ciclo celular, con similitud de secuencia con coactivadores del APC/C que coordinan la proteólisis mediada por ubiquitina durante la progresión mitótica. Aunque está menos caracterizado que CDC20, la expresión y el contexto genómico de CDC20B se han vinculado a programas proliferativos y estados de diferenciación en determinados tejidos, lo que sugiere funciones en el control de transiciones que acoplan la temporización del ciclo celular con la remodelación celular. Por lo tanto, la alteración de CDC20B puede influir en vías que gobiernan el control de puntos de control, la estabilidad cromosómica y el recambio regulado de proteínas. Estos procesos se alteran con frecuencia en el cáncer y otros trastornos con proliferación desregulada, lo que convierte a CDC20B en un objetivo útil para estudios mecanísticos del control del crecimiento.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Cdc20B (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CDC20B en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CDC20B junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CDC20B tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Cdc20B.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CDC20B para la investigación de la señalización de Cdc20B, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de CDC20B críticos para la función de Cdc20B
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CDC20B para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Cdc20B CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Cdc20B CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CDC20B. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Cdc20B (h) y el plásmido HDR Cdc20B (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CDC20B para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CDC20B definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.