CD96 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-407300

Panoramica

CD96 è un recettore della superfamiglia delle immunoglobuline di tipo I transmembrana, espresso principalmente su cellule T e cellule NK, dove modula la formazione della sinapsi immunologica e la funzione effettrice citotossica. Partecipa a processi di adesione e a segnali co-inibitori attraverso interazioni all’interno della rete delle nectine/nectin-like, influenzando le vie di segnalazione che regolano le soglie di attivazione e la produzione di citochine. La funzione di CD96 si intreccia con la regolazione dei checkpoint immunitari insieme a recettori quali TIGIT e CD226, plasmando le risposte verso cellule stressate o trasformate nel microambiente tumorale. Un’attività e un’espressione di CD96 deregolate sono state associate ad alterazioni dell’immunità antitumorale, infiammazione cronica e meccanismi di evasione immunitaria rilevanti per la ricerca in oncologia e immunologia.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO CD96 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene CD96 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del CD96 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto CD96 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina CD96.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di CD96 per lo studio della segnalazione di CD96, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni CD96 critici per la funzione di CD96
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di CD96 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal CD96 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal CD96 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus CD96. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal CD96 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR CD96 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia CD96 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio CD96 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.