Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CD88 Plasmide Double Nickase (m): sc-419395-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CD88 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CD88 Double Nickase Plasmid (m) e il CD88 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira C5ar1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CD88 Antibody (R63): sc-53797
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CD88 Plasmide Double Nickase (m) | sc-419395-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD88 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-419395-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
C5ar1 codifica CD88, il recettore canonico accoppiato a proteine G per l’anafilotossina del complemento C5a, collegando l’attivazione del complemento alla chemiotassi dei leucociti, alla degranulazione, al burst ossidativo e alla produzione di citochine. La segnalazione di CD88 attiva vie che includono PI3K–AKT, MAPK/ERK, PLCβ–flusso di Ca²⁺ e NF-κB, modulando l’attivazione dell’immunità innata e il traffico delle cellule infiammatorie. Nei modelli murini, l’attività di C5ar1 è spesso studiata in contesti di infezione, infiammazione sterile, autoimmunità, neuroinfiammazione e danno tissutale, in cui le risposte guidate dal complemento influenzano i fenotipi associati alla malattia. Poiché CD88 è espresso in diverse popolazioni mieloidi e in alcune cellule non ematopoietiche, rappresenta un nodo chiave per analizzare il crosstalk tra complemento e sistema immunitario in microambienti complessi.
CD88 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus C5ar1 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di C5ar1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di C5ar1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con C5ar1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.