Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
CD42c Plasmide Double Nickase (h): sc-403712-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CD42c Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CD42c Double Nickase Plasmid (h) e il CD42c Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira GP1BB. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CD42c Antibody (F-11): sc-377129
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CD42c Plasmide Double Nickase (h) | sc-403712-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD42c Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403712-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GP1BB codifica la catena beta della glicoproteina piastrinica Ib (CD42c), un componente essenziale del complesso recettoriale GPIb-IX-V che media l’ancoraggio e l’adesione delle piastrine al fattore di von Willebrand in condizioni di elevato stress di taglio. Attraverso il coordinamento con proteine adattatrici del citoscheletro e nodi di segnalazione quali le chinasi della famiglia Src e vie dipendenti da PI3K, CD42c contribuisce all’attivazione piastrinica, alle risposte procoagulanti e alla formazione del trombo. La compromissione genetica o l’espressione alterata di GP1BB perturbano l’assemblaggio del recettore sulla superficie e la funzione piastrinica, collegando questo asse a disordini piastrinici ereditari caratterizzati da macrotrombocitopenia e fenotipi emorragici. Di conseguenza, GP1BB è ampiamente studiato in modelli di biogenesi piastrinica, emostasi e meccanotrasduzione rilevanti per la biologia vascolare e la ricerca sulla trombosi infiammatoria.
CD42c Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus GP1BB nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di GP1BB. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di GP1BB. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con GP1BB interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.