Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CD42b Plasmide Double Nickase (h): sc-401273-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CD42b Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CD42b Double Nickase Plasmid (h) e il CD42b Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira GP1BA. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CD42b Antibody (E-8): sc-271171
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CD42b Plasmide Double Nickase (h) | sc-401273-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD42b Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401273-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GP1BA codifica la glicoproteina piastrinica Ib alfa (CD42b), una subunità chiave del complesso recettoriale GPIb-IX-V che media l’ancoraggio delle piastrine al fattore di von Willebrand in condizioni di elevato shear stress. L’adesione mediata da CD42b avvia programmi di segnalazione che coordinano l’attivazione piastrinica, il rimodellamento del citoscheletro e l’ingaggio delle integrine, collegando le risposte emostatiche alle vie tromboinfiammatorie. Questo asse interagisce con la meccanotrasduzione e con reti di segnalazione prossimali al recettore che regolano l’aggregazione piastrinica e la stabilità del trombo. Alterazioni genetiche o funzionali di GP1BA sono associate a difetti ereditari dell’adesione piastrinica e a fenotipi modificati legati a sanguinamento o trombosi, rendendolo un bersaglio rilevante per studi meccanicistici della biologia piastrinica.
CD42b Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus GP1BA nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di GP1BA. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di GP1BA. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con GP1BA interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.