CD362/SDC2/Syndecan-2 Plasmide Double Nickase (h): sc-401392-NIC

SDC2 codifica la sindecano-2 (CD362), un proteoglicano transmembrana a eparan solfato che organizza le interazioni cellula–matrice legando componenti della matrice extracellulare e fattori di crescita sulla superficie cellulare. Attraverso le sue catene di eparan solfato e il motivo citoplasmatico di legame ai domini PDZ, la sindecano-2 influenza l’adesione integrina-dipendente, la dinamica delle adesioni focali e il rimodellamento del citoscheletro di actina, con effetti su migrazione e proliferazione. SDC2 partecipa a reti di segnalazione che includono le vie FGF, VEGF e correlate a Wnt modulando la disponibilità dei ligandi e l’assemblaggio dei complessi recettoriali, con effetti a valle sulla segnalazione MAPK/ERK e PI3K-AKT. Un’espressione o uno shedding deregolati di SDC2 sono stati associati ad alterazioni delle interazioni con lo stroma e a fenotipi invasivi in diversi tumori, rendendolo rilevante per studi sul crosstalk del microambiente tumorale, sulla segnalazione angiogenica e sui comportamenti cellulari associati alla metastasi.

CD362/SDC2/Syndecan-2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SDC2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SDC2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SDC2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SDC2 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.