Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
CD21 Plasmide Double Nickase (h): sc-401352-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CD21 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CD21 Double Nickase Plasmid (h) e il CD21 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CR2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CD21 Antibody (A-3): sc-13135
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CD21 Plasmide Double Nickase (h) | sc-401352-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD21 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401352-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il CR2 umano codifica CD21, un recettore del complemento espresso prevalentemente sui linfociti B e sulle cellule dendritiche follicolari, che lega antigeni marcati con C3d per amplificare la segnalazione del recettore dei linfociti B. CD21 forma un complesso corecettoriale con CD19 e CD81 per abbassare le soglie di attivazione e coordinare la cattura, il traffico e la presentazione dell’antigene nelle reazioni del centro germinativo. Attraverso l’opsonizzazione dipendente dal complemento e la gestione dei complessi immuni, CD21 contribuisce alla maturazione della risposta adattativa e alla memoria immunologica. Alterazioni dell’espressione o della funzione di CR2/CD21 sono state associate a una disregolazione dell’immunità umorale e sono state studiate in contesti quali l’infiammazione autoimmune e la biologia delle neoplasie correlate ai linfociti B.
CD21 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CR2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CR2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CR2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CR2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.