Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
CD19 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-419534
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CD19 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico CD19, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CD19 Antibody (F-3): sc-373897
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CD19 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m) | sc-419534 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
Il gene murino **Cd19** codifica **CD19**, un co-recettore di superficie ristretto alle cellule B che amplifica la segnalazione del complesso del recettore delle cellule B (BCR) tramite il reclutamento di chinasi e proteine adattatrici, coordinando l’attività a valle delle vie **PI3K/AKT** e **MAPK**. Modulando le soglie di attivazione, il flusso di calcio, la proliferazione e la sopravvivenza, CD19 contribuisce alle risposte del centro germinativo e a un’immunità umorale efficace. Alterazioni della segnalazione dipendente da CD19 e degli stati di differenziamento delle cellule B sono ampiamente utilizzate come readout meccanicistici in immunologia e nei modelli di malattie ematologiche, inclusi studi sull’attivazione aberrante delle cellule B e sull’identità di linea.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO CD19 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Cd19 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Cd19 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Cd19 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina CD19.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Cd19 per lo studio della segnalazione di CD19, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni Cd19 critici per la funzione di CD19
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Cd19 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal CD19 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal CD19 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Cd19. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal CD19 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR CD19 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Cd19 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Cd19 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.