CCDC25 Plasmide Double Nickase (h): sc-408656-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CCDC25 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CCDC25 Double Nickase Plasmid (h) e il CCDC25 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CCDC25. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CCDC25 Antibody (F-7): sc-515201
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CCDC25 Plasmide Double Nickase (h) | sc-408656-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CCDC25 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-408656-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano **CCDC25** codifica una proteina contenente un dominio **coiled-coil**, che si ritiene contribuisca all’impalcatura delle interazioni proteina-proteina e all’organizzazione spaziale di complessi di segnalazione o strutturali. Le proteine coiled-coil partecipano spesso alla regolazione del citoscheletro, al traffico associato alle membrane e al coordinamento della polarità cellulare, suggerendo che CCDC25 possa influenzare l’architettura cellulare e i rimodellamenti dinamici. L’espressione alterata o la perturbazione dei componenti delle reti coiled-coil è stata collegata a proliferazione, migrazione e risposte allo stress deregolate, rendendo CCDC25 un bersaglio rilevante per studi meccanicistici in biologia del cancro e nella fisiopatologia correlata. Indagare la funzione di CCDC25 può aiutare a chiarire come gli assemblaggi mediati da coiled-coil integrino vie di segnalazione e strutturali che modellano il comportamento cellulare.
CCDC25 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CCDC25 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CCDC25. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CCDC25. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CCDC25 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.