CCDC125 Plasmide Double Nickase (h): sc-415026-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CCDC125 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CCDC125 Double Nickase Plasmid (h) e il CCDC125 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CCDC125. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CCDC125 Plasmide Double Nickase (h) | sc-415026-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CCDC125 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-415026-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CCDC125 codifica una proteina contenente un dominio coiled-coil, prevista agire da scaffold per interazioni proteina–proteina, supportando l’organizzazione di complessi intracellulari e la regolazione spaziale della segnalazione. Le proteine coiled-coil contribuiscono comunemente all’architettura del citoscheletro, al trasporto vescicolare e al coordinamento delle vie del ciclo cellulare e della risposta allo stress, sebbene i partner molecolari specifici di CCDC125 rimangano non completamente definiti. Un’espressione alterata o una connettività di rete deregolata degli scaffold coiled-coil è spesso associata a difetti nel mantenimento del genoma, nella progressione mitotica e nell’omeostasi cellulare. Queste caratteristiche rendono CCDC125 un bersaglio rilevante per studi meccanicistici che collegano l’organizzazione subcellulare ai fenotipi osservati in contesti patologici proliferativi e associati allo stress.
CCDC125 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CCDC125 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CCDC125. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CCDC125. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CCDC125 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.