CBX7 Plasmide Double Nickase (h): sc-402903-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CBX7 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CBX7 Double Nickase Plasmid (h) e il CBX7 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CBX7. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CBX7 Antibody (G-3): sc-376274
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CBX7 Plasmide Double Nickase (h) | sc-402903-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CBX7 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402903-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CBX7 (chromobox 7) codifica una proteina con cromodominio del gruppo Polycomb che riconosce H3K27me3 e contribuisce all’assemblaggio dei complessi canonici PRC1, promuovendo la compattazione della cromatina e una repressione trascrizionale stabile. Attraverso la regolazione di programmi genici dello sviluppo, dei checkpoint del ciclo cellulare e della senescenza cellulare, CBX7 contribuisce al mantenimento della memoria epigenetica e di stati trascrizionali specifici di linea. Un’attività deregolata di CBX7 è stata associata ad alterazioni della differenziazione e del controllo proliferativo in molteplici contesti patologici, inclusi i tumori, dove cambiamenti nel silenziamento mediato da Polycomb possono rimodellare reti oncogeniche e di geni oncosoppressori. In quanto “lettore” della cromatina all’interno delle vie Polycomb, CBX7 è spesso studiato per chiarire come i segni istonici vengano interpretati per controllare gli output trascrizionali a livello dell’intero genoma.
CBX7 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CBX7 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CBX7. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CBX7. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CBX7 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.